Люминесцентная микроскопия
Люминесцентная микроскопия представляет собой метод оптического микроскопа, использующий световое излучение для возбуждения флуоресцентных соединений в пробе и последующей регистрации испускаемого ими света.
Принцип работы люминесцентной микроскопии
Принцип работы люминесцентного микроскопа основан на использовании флуоресценции — способности определенных веществ или соединений поглощать энергию излучения определенной длины волны и испускать свет другой длины волны. В микроскопе используется источник света, который возбуждает флуоресцентные соединения в пробе, и объектив, который собирает испускаемый свет и создает изображение.
Чем люминесцентный микроскоп отличается от обычного светового микроскопа?
Люминесцентный микроскоп отличается от обычного светового микроскопа тем, что использует флуоресценцию в пробе. В обычном световом микроскопе используется пропускание света через прозрачную пробу, а в люминесцентном микроскопе проба сама испускает свет. Кроме того, люминесцентный микроскоп позволяет исследовать более специфичные молекулы и структуры, так как использует разные флуорофоры для разных компонентов пробы.
Методы люминесцентной микроскопии
Основные методы люминесцентной микроскопии включают:
- Широкопольная флуорсцентная микроскопия (Widefield Fluorescence Microscopy) — использует обычные флуорофоры для получения изображений всей пробы.
- Конфокальная микроскопия (Confocal Microscopy) — использует принцип отсечения внефокусного света из соседних зон по оси Z, для получения более точного 3D изображения пробы.
- Структурированное освещение (Structured Illumination Microscopy) — использует модуляцию световых полос, создаваемых источником света со структурам объекта, для вычисления дополнительной информации об объекте для улучшения разрешения изображения.
- Стимулированное затухание эмиссии (Stimulated Emission Depletion Microscopy) – использует вихревой диффракционный элемент, который позволяет поступать сигнальной флуоресценции только из очень небольшой (25 нм) центральной зоны лазерного пучка.
- FLIM (Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy) — измеряет время жизни флуоресценции для получения информации о молекулярных процессах в пробе, позволяет разделять красители по временам жизни флуоресценции.
- Однофотонная и многофотонная микроскопия (Single Photon and Multiphoton Microscopy) — использует нелинейные явления для возбуждения флуорофоров для получения изображения, позволяя проникать свету глубже в толщу объекта.
Люминесцентная микроскопия является мощным инструментом для визуализации и изучения структуры и функции клеток и тканей. Она отличается от обычного светового микроскопа тем, что использует флуоресценцию в пробе и позволяет исследовать более специфичные молекулы и структуры. В зависимости от метода, люминесцентная микроскопия может обеспечить высокое разрешение и детализацию изображений, а также получение информации о молекулярных процессах в пробе. Этот метод широко применяется в биологии, медицине, фармакологии и других областях научных исследований.
Другие новости
